fa تعیین خصوصیات لاین سلولی BHK-21C5 و معرفی آن جهت استفاده در مطالعات تحقیقاتی، تشخیصی و تولید فرآورده‌‌‌های بیولوژیک تخصصي Special پژوهشي Research <strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">زمینه و هدف:</span></span></strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> مطالعات متعددی برای استفاده از لاین‌های سلولی در مطالعات تحقیقاتی، تولید و فرآوری داروها و فراورده‌های بیولوژیک و تشخیص سمیت و اثربخشی مواد صورت گرفته است. مطالعه حاضر به منظور بررسی خصوصیات لاین سلولی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">BHK-21 C5</span></span></span> <span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">به عنوان یک بستر مناسب جهت استفاده در فرآیند تولید و کنترل کیفیت واکسن و یا کشت ویروس‌ها و مطالعات تحقیقاتی و تشخیصی انجام شده است. </span></span><br> <strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">مواد و روش</span></span></strong><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">‌</span></span></strong><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">ها:</span></span></strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> در این مطالعه کاربردی- توسعه ای با تهیه بذر سلولی مناسب، سلول‌ به روش</span></span> <span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">Limit dilution </span></span></span><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">کلون شد. پس از بررسی ویژگی‌های رشد سلول، </span></span><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">آزمایشات سترونی برای بررسی آلودگی‌های باکتریایی، قارچی، مایکوپلاسمایی و مایکوباکتریومی و آزمایش‌های تعیین هویت سلول با استفاده از آزمایش‌های مولکولار در کنار لاین‌های سلولی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">CHO</span></span></span><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">، </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">LK</span></span></span><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">، </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">RBK</span></span></span><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">، </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">MRC5</span></span></span><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">، و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">Vero</span></span></span><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> و کاریوتایپینگ </span></span><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">انجام</span></span><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> شد.</span></span><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> همچنین بذر سلولی مادر از جهت وجود ویروس‌های ناخواسته، </span></span><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">در </span></span><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">روش مستقیم از طریق ایجاد ضایعات سلولی در طول دوره انکوباسیون و در روش غیر‌مستقیم با استفاده از آزمایش‌های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">Heamadsorption</span></span></span><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">، تزریق به تخم مرغ جنین‌دار، تزریق به موش بالغ و شیرخوار </span></span><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">مورد سنجش قرار گرفت. </span></span><br> <strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">یافته ها:</span></span></strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> آزمایش‌های انجام شده بر روی لاین سلولی مذکور نشان می‌دهد که این سلول دارای ویژگی‌های رشد مناسب بوده و فاقد آلودگی‌های متقاطع می‌باشد. همچنین هویت سلول با روش‌های کاریوتایپینگ و مولکولار تایید شد.</span></span><br> <strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">نتیجه‌گیری:</span></span></strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> نتایج آزمایش‌های مختلف نشان می‌دهد که این لاین سلولی الزامات لازم برای استفاده در تولید و کنترل کیفیت فرآورده‌های بیولوژیک و همچنین مطالعات تحقیقاتی را دارا می‌باشد.</span></span> <strong>Background and Objectives:</strong> Several studies have been carried out on the use of cell lines in researches, production and processing of drugs and biological products, and on the identification of toxicity and efficacy.The present study was conducted to determine the characteristics of BHK-21 cell lines as a suitable substrate for use in vaccine production and quality control, viral culture and research and diagnostic studies.<br> <strong>Materials and Methods:</strong> In this study cloning of the cells by limit dilution was performed by preparing the appropriate seed cells. After checking the cell growth characteristics, sterility tests performed to ensure the absence of bacterial, fungal, mycoplasma, and mycobacterial infections.&nbsp; Detection of chromosomal diversity by karyotyping and cell identity using molecular tests along the CHO,LK,RBK,MRC5,Vero,GL cell lines was done. Also, master cell seed was tested for detection of adventitious viruses in two methods:&nbsp; in direct way through cytopathic effect during incubation of cell cultures and in indirect method using hemadsorption test, inculation into embryonic eggs, injection into mature and newborn mice.<br> <strong>Results: </strong>The results indicated, this cell line had suitable growth charestristics without cross contaminations. Also the cell identity was confirmed by karyotyping and molecular tests. &nbsp;<br> <strong>Conclusion:</strong>The results of various tests indicated that this cell line has the necessary requirements for use in the production and quality control of the biological products and viral researches. لاین سلولی BHK, تعیین خصوصیات, کاریوتایپینگ, واکسن, بذر سلولی مادر BHK cell line, Karyotyping, Vaccine, Master cell seed, Characterization 405 414 http://aums.abzums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1032-2&slc_lang=fa&sid=1 Fereshteh Ziaiifar فرشته ضیائی فر 10031947532846006634 10031947532846006634 No Department of Biology, Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran کارشناسی ارشد رشته زیست شناسی سلولی و مولکولی دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات، گروه زیست شناسی، تهران، ایران Sina Soleimani سینا سلیمانی s.soleimani@rvsri.ac.ir 10031947532846006635 10031947532846006635 Yes Department of Bio bank, Razi Vaccine & Serum Research Institute, Agricultural Research Education and Extension Organization (AREEO), Karaj, Iran دکترای تخصصی ویروس شناسی، استادیار دپارتمان بیوبانک، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران Mohsen Lotfi محسن لطفی 10031947532846006636 10031947532846006636 No Department of Viral Vaccine Quality Control, Razi Vaccine & Serum Research Institute, Agricultural Research Education and Extension Organization (AREEO), P.O. Karaj, Iran دکترای تخصصی میکروبیولوژی، دانشیار دپارتمان کنترل کیفی واکسن‌های ویروسی ، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، کرج، ایران