fa شناسایی ژن‌های مقاومت به سولفانامید (‌sul2‎، ‌sul3‎‌) ، تتراسایکلین‌tet(A)‎‌ ، ‌tet(C)‎‌ ، ‌tet(D)‎‌ و اینتگرون ‌intI‌ در نمونه اشریشیاکلی جداسازی شده از نمونه‌های ورم پستان (Mastitis) تخصصي Special پژوهشي Research <strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">زمینه و اهداف</span></span></strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">: باکتری <em>اشریشیاکلی</em> جزء میکروفلور طبیعی روده انسان و تمامی حیوانات خونگرم است. ورم پستان که توسط عوامل مختلف بیماریزا ایجاد می&shy;گردد. از عوامل مهم ایجاد ورم پستان </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">(Mastitis)</span></span></span><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> در دام، باکتری </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">E.coli</span></span></span></em><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> بوده وتحت عنوان ورم پستان&shy;های محیطی شناخته می&shy;شود. این مطالعه با هدف جداسازی ژن‌های مقاومت سولفونامیدی، اینتگرون و تتراسایکلین در <em>اشریشیاکلی</em> جدا شده از ورم پستان با علائم بالینی به روش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">Multiplex PCR</span></span></span><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> انجام گرفته است.</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;"></span></span></span><br> <strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">مواد و روش&shy;کار</span></span></strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">: تعداد 50 ایزوله شیر دارای علائم ورم پستان از دامداریهای غرب استان تهران جمع‌آوری شد. آزمون&shy;های مختلف بیوشیمیایی و میکروبی انجام و آزمون حساسیت آنتی&shy;بیوتیکی به روش دیسک دیفیوژن طبق دستورالعمل 2016 </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">CLSI</span></span></span><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">E-test</span></span></span><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> با آنتی بیوتیک&shy;هایی از گروه&shy;های مختلف انجام گردید.پس ازجداسازی باکتری واستخراج </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">DNA</span></span></span><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> ، حضور ژن‌های موردمطالعه به&shy;روش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">Multiplex PCR</span></span></span><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> بررسی شد. </span></span><br> <strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">یافته‌ها</span></span></strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">: براساس یافته‌های این پژوهش از مجموع 50 نمونه، 1نمونه (2%) دارای ژن </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">Sul₂</span></span></span></em> <span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">و 32 نمونه (64%) واجد ژن </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">tetA</span></span></span></em><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> و 11 نمونه (36%) ژن </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">tetC</span></span></span></em><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> بود. همچنین ژن </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">Int</span></span></span></em><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> در 1نمونه معادل 2% از نمونه&shy;ها شناسایی و</span></span> <span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">بیشترین مقاومت آنتی&shy;بیوتیک به آنتی&shy;بیوتیک سولتریم و کوتریموکسازول به ترتیب 68 % و50 % و بیشترین حساسیت به تتراسایکلین 96 % گزارش شد.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">بحث</span></span></strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">: مقایسه این مطالعه با سایر تحقیقات صورت گرفته نشان داد که ژن مقاومت در <em>اشریشیاکلی‌های</em> جدا شده از ورم پستان زیاد است. </span></span><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">اختلاف نتایج بدست آمده از روش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">Multiplex PCR</span></span></span><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;"> در این مطالعه با نتایج مطالعات سایر محققان در نقاط مختلف دنیا <a name="OLE_LINK12"></a><a name="OLE_LINK11">ممکن است به علت منبع نمونه وتفاوت&shy; در مناطق جغرافیایی باشد،</a></span></span> <span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:10.0pt;">درمطالعات سایرمحققین بیشترموارد برروی نمونه&shy;های مبتلا به اسهال بررسی شده است. </span></span> <strong>Background and Aims:</strong> <em>Escherichia coli</em> is a natural microflora of the human heart and all the warm animals. Mastitis is a disease caused by various pathogens. One of the important factors in the production of mastitis in the livestock is <em>E. coli</em> and is known as peripheral mastitis. The aim of this study was to isolate sulfonamide, integron and tetracycline resistance genes in <em>E.coli</em> isolated from mastitis with clinical symptoms using Multiplex PCR.<em><span dir="RTL"></span></em><br> <strong>Materials and Methods:</strong> 50 milk isolates with mastitis symptoms were collected from livestock farms in west of Tehran. Biochemical and microbial tests were performed and antibiotic susceptibility test using disc diffusion method was performed according to CLSI 2016 and E-test with antibiotics of different groups. After isolating the bacteria and extracting DNA, the presence of the genes was investigated by Multiplex PCR.<br> <strong>Results:</strong> Based on the findings of this study, out of a total of 50 samples, 1 sample (2%) had <em>Sul₂</em> gene and 32 samples (64%) had the <em>tetA</em> gene and 11 samples (36%) of the <em>tetc</em> gene. Also Int gene was detected in 1 sample of 2% of the samples and the highest antibiotic resistance to the antibiotic sultrim and cotrimoxazole were 68% and 50%, respectively, and the highest sensitivity to tetracycline was 96%.<span dir="RTL"></span><br> <strong>Conclusion:</strong> Comparison of this study with other studies has shown that the resistance gene in <em>E.coli</em> isolated from mastitis is high. The difference between the results of the M-PCR method in this study and the results of studies by other researchers in different parts of the world may be due to the source of the sample, while in studies of other researchers, most cases have been studied on samples of blood diarrhea. Another reason for the difference is the difference in geographical areas. اشریشیاکلی, ورم پستان, ژن‌های مقاومت سولفانامیدی, تتراسایکلین Escherichia coli, Mastitis, Sulfonamides resistance genes, tetracycline 365 376 http://aums.abzums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-931-6&slc_lang=fa&sid=1 Reza Salimi رضا سلیمی 10031947532846006469 10031947532846006469 No Department of Microbiology, Roudehen Branch, Islamic Azad University, Roudehen, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، واحد رودهن، دانشگاه آزاد اسلامی، رودهن، ایران Ali Chitgar علی چیتگر 10031947532846006470 10031947532846006470 No Assistant Professor, Department of Microbiology, Roudehen Branch, Islamic Azad University, Roudehen, Iran استادیار، گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، واحد رودهن، دانشگاه آزاد اسلامی، رودهن، ایران Alireza Mokhtari علیرضا مختاری alm3370@gmail.com 10031947532846006471 10031947532846006471 Yes Technical Assistant of the Department of Microbiology, Atiyeh Veterinary Laboratory مسئول فنی بخش میکروب‌شناسی، آزمایشگاه دامپزشکی آتیه البرز